Evaluación de la absorción/biodisponibilidad de suplementos de hierro y selenio en leches fórmula y estudio del efecto de la suplementación con yodo durante la lactancia

Resumen

En la presente Tesis, el objetivo general ha sido doble: Por un lado, se han investigado las posibilidades del empleo de Isótopos Estables de Fe y Se, en combinación con Deconvolución de Perfiles Isotópicos (IPD) e ICP-MS para estudiar la biodisponibilidad de los suplementos de hierro y selenio de leches fórmula, en ratas lactantes. Por otro lado se ha evaluado la suplementación con yodo, como yoduro potásico, durante la lactancia, en madres y niños recién nacidos. El trabajo ha sido realizado mediante la consecución de objetivos específicos, obteniéndose los siguientes resultados y conclusiones de interés: 1.- Desarrollo de una metodología analítica, basada en IPD-ICP-MS, para la cuantificación de selenio endógeno (natural) y exógeno (trazador 77Se) presente en las muestras. El método se validó mediante el análisis de muestras de referencia de orina y suero certificadas. La metodología propuesta fue aplicada al estudio de la distribución del selenio en muestras de suero y orina de las ratas objeto de estudio. El 77Se (exógeno) excretado en orina se incrementa con los días de suplementación, observándose a los 11-12 días un cross-over point donde la concentración de selenio exógeno es mayor que la de endógeno. Este periodo parece corresponder con la vida media del selenio en las ratas suplementadas. La absorción aparente del 77SeO32- se mantiene constante durante la suplementación (98%), mientras que la retención aparente decrece gradualmente y rápidamente al 11 día (desde el 84 al 40%), La mayor parte del selenio se elimina por la orina. 2.- Desarrollo de una metodología basada en HPLC-IPD-ICP-MS para la especiación y/o cuantificación de las diferentes selenoespecies conteniendo selenio exógeno y/o endógeno presentes en los fluidos y tejidos de la rata en estudio (orina, suero y eritrocitos). La validación de dicha la metodología HPLC-IPD-ICP-MS se realizó mediante el análisis de muestras de orina certificadas y la técnica del doble spike. Los resultados obtenidos muestran diferente metabolismo para el selenio natural que para el selenio exógeno. La identificación y caracterización del selenoazúcar en orina se realizó por ESI-MS y HPLC-APCI-MS. Además, mediante HPCL-APCI-MS ha sido posible identificar dicho metabolito en el hígado y riñón de las ratas alimentadas con leche materna y con fórmula suplementada. 3.- Una metodología similar, basada en IPD-ICP-MS, se desarrolló para el estudio del metabolismo del Fe. La validación de la metodología ha sido realizada mediante el análisis de materiales de referencia (suero, orina e hígado) certificados en hierro natural sobre los que se adicionó cantidades conocidas de 57Fe (como trazador) y de 54Fe para la cuantificación. La metodología ha sido aplicada a la determinación del hierro endógeno y exógeno en muestras de orina, heces, suero, eritrocitos, hígado y riñones de ratas lactantes. A partir de dichos datos, ha sido posible la determinación de la absorción y retención aparente de hierro en forma de sulfato ferroso, así como la absorción fraccional del mismo. 4.- Se ha puesto a punto una metodología analítica para la cuantificación de yodo en orina y leche, mediante recta de calibrado y detección por espectrometría de masas elemental ICP-MS. Esta metodología se ha validado mediante el análisis de materiales de referencia de orina y leche certificados en yodo Dicha metodología ha sido aplicada a la determinación de los niveles de yodo en muestras de orina de madres suplementadas con yoduro de potasio y en sus hijos, en muestras de orina de niños cuya alimentación ha sido leche fórmula comercial, así como en muestras de leche humana y leche fórmula comercial. Los niveles de yodo obtenidos en orina y leche han sido comparados según hayan sido o no suplementadas las madres, mediante análisis estadístico, concluyéndose la adecuación de suplementación con yodo durante la lactancia.