Calcificaciones vascularesmecanismos celulares y moleculares

Résumé

La hiperfosfatemia está estrechamente ligada a las Calcificaciones Vasculares en la Insuficiencia Renal Crónica. Asimismo, cuando son cultivadas con concentraciones altas de fósforo (P), las Células de Músculo Liso Vascular (CMLV) calcifican y experimentan una transdiferenciación hacia un fenotipo osteogénico. Dicha transición implica la disminución de la expresión de marcadores miogénicos, como SM22¿, y el aumento de proteínas características de células osteogénicas, como Cbfa-1. Uno de los mecanismos epigenéticos que ocasionan la disminución en la expresión de ciertos genes es el silenciamiento génico mediante la metilación de regiones reguladoras. Nuestra Hipótesis es que este mecanismo podría estar involucrado en la transición osteogénica de las CMLV. El Objetivo General de esta Tesis es el estudio de los mecanismos por los cuales el P induce CV en CMLV in vitro. Para desarrollarlo se estudiaron los siguientes aspectos en CMLV expuestas a alto P: el efecto del P en la calcificación de las CMLV, así como en la expresión de SM22¿ y Cbfa1; la metilación del promotor de SM22¿; las consecuencias de la inhibición del cotransportador de P, Pit-1; el potencial desmetilante de la procaína y el efecto de la desmetilación en la CV y la expresión de SM22¿ y Cbfa1. Resultados: Las CMLV cultivadas con alto P calcificaron y presentaron una disminución en la expresión de SM22¿ aunada al aumento en la expresión de Cbfa1. Además, en CMLV expuestas a alto P, el promotor de SM22¿ resultó metilado de una manera tiempo-dependiente. La inhibición del Pit-1 evitó la calcificación y la transdiferenciación de CMLV, y también previno la metilación del promotor de SM22¿. Además, la adición de un agente desmetilante (procaína) al medio de cultivo con alto P revirtió la metilación del promotor de SM22¿, restableciendo la expresión del este gen, y previniendo la calcificación y la expresión de Cbfa1. Conclusión: La metilación del promotor de SM22¿ inducida por altas concentraciones de P, en modelos in vitro de calcificación vascular, podría ser un paso necesario para que la CMLV se transforme a célula osteogénica.